1. Tambahkan sampel: Tambahkan pengenceran sampel ke pelat yang dilapisi, encerkan serum dalam PBS atau saline pada 1:20, lalu tambahkan 10 ul ke sumur reaksi pelat mikro.

2. Penambahan kontrol: kontrol negatif 3 sumur, kontrol positif 1 sumur, dan serum kontrol 100ul.

3. Inkubasi: Kocok pelat reaksi untuk mencampur sampel dengan baik dan kemudian letakkan di inkubator 37 ° C atau penangas air selama 20 menit.

4. Pencucian lantai: Encerkan 15ml larutan pencuci menjadi 300ml dengan air suling. Saat mencuci dengan tangan, isi udara pelat reaksi harus dituang keluar dan ditempatkan di lubang berisi cairan pencuci, lalu didiamkan 30 hingga dikocok dengan kuat. Ulangi operasi ini 5 kali dan kocok hingga kering. Mesin perlu melakukan 5 kali. Larutan pencuci 200ul dapat disuntikkan ke setiap sumur atau diisi, lalu dibiarkan selama 30 menit dan dikeringkan.

5. Tambahkan larutan kerja berlabel enzim: Tambahkan 100ul larutan kerja berlabel enzim ke setiap sumur dalam inkubator 37 ° C dan cuci piring lima kali setelah 20 menit. Piring cuci sama seperti pada langkah 4.

6. Ini adalah langkah terakhir dari reaksi, dengan pengembangan warna dan penghentian reaksi: 50ul substrat ditambahkan ke sumur reaksi dan warna dikembangkan selama 10 menit dalam gelap pada suhu 37 ° C. Larutan di setiap sumur dihentikan dan dicampur untuk menghentikan reaksi. Penggunaan pelat mikro harus dilakukan dalam kondisi steril. Disinfeksi dan bersihkan piring dengan hati-hati setelah digunakan, tetapi perhatikan bahwa beberapa piring perlu membaca petunjuk dengan hati-hati untuk melihat apakah dapat disterilkan pada suhu tinggi.