Secara umum, karena komposisi darah yang kompleks, banyak zat, terutama plasma atau serum hewan tingkat tinggi, memiliki efek interferensi yang kuat pada reaksi antara reagen TAL (LAL) dan endotoksin. Oleh karena itu, saat kami menguji endotoksin dari sampel tersebut, kami harus menghilangkan zat pengganggu sebelum pengujian.

Saat ini, zat pengganggu dalam plasma terutama mencakup berbagai penghambat protease, protein pengikat endotoksin, dan penghambat plasminogen. Untuk kolorimetri, faktor Xa dapat menguraikan rantai peptida Boc-LEU-Gly-Arg-PNA. Oleh karena itu, perlu untuk menghilangkan zat-zat pengganggu ini sebelum penentuan.

Metode pretreatment untuk menghilangkan zat yang mengganggu dalam darah adalah sebagai berikut:

(1) Metode pemanasan pengenceran: plasma diencerkan 3~10 kali dengan air terlarut, lalu dipanaskan dalam air 37~100 ℃. Waktu penahanan biasanya 5~10 menit;

(2) Metode ekstraksi kloroform: tambahkan kloroform dalam jumlah yang sama ke plasma dan getar selama 3 jam, lalu ambil lapisan atas untuk deteksi;

(3) Metode perawatan eter: tambahkan eter ke plasma untuk perawatan dan keluarkan eter pada 40 ℃;

(4) Metode asam trifluoroasetat: tambahkan asam asetat ke dalam plasma untuk menyesuaikan pH 4,0, lalu gunakan K2HPO4 untuk menyesuaikan pH menjadi 7~7,5;

(5) Metode pengolahan surfaktan: seperti metode pemanasan pengenceran, hanya air pengenceran yang diubah menjadi surfaktan;

(6) Filtrasi gel;

(7) Metode pengobatan alkali: plasma disimpan pada 0,2NNaOH 37 ℃ selama 10 menit dan kemudian dinetralkan dengan HCl;

(8) Metode asam perklorat (PCA) atau metode asam perklorat baru (PCA Baru);

(9) Metode manik-manik: masukkan endotoksin penyerap resin khusus ke dalam plasma, keluarkan, dan tambahkan reagen LAL untuk reaksi.

Di antara metode tersebut, metode yang umum digunakan adalah metode ekstraksi kloroform, metode pemanasan pengenceran, metode asam perklorat (PCA), dan metode asam perklorat baru (PCA Baru). Dua metode pertama perlu didiskusikan selama penentuan karena adanya tingkat pemulihan endotoksin, positif palsu, dan masalah lainnya. Metode PCA (New PCA method), karena tingkat pemulihan endotoksin tambahan yang baik, saat ini terutama digunakan dalam pengobatan praklinis di Jepang.