1. Saat menentukan endotoksin dalam darah, perhatikan pemilihan metode dan reagen.

2. Persiapan plasma atau serum

Sebagai sampel klinis umum, plasma adalah sampel utama, dan tingkat pemanfaatannya lebih dari 95%. Oleh karena itu, sangat penting menyiapkan plasma sebagai bagian utama cairan tubuh. Menurut Das, endotoksin umumnya melekat pada trombosit selain keadaan bebasnya, sehingga lebih tepat menggunakan plasma yang mengandung banyak trombosit sebagai sampel. Saat menyiapkan plasma manusia atau plasma hewan, saat ini untuk mencegah kerusakan sel, negara-negara asing kebanyakan menggunakan pemisahan suhu rendah, menggunakan sampel plasma yang mengandung sejumlah besar trombosit, yaitu pada kondisi pemisahan 4 ℃ 1000gx10 menit, atau 3000gx40 kondisi pemisahan detik ketika tidak ada centrifuge suhu rendah. Tidak diperbolehkan melakukan pemisahan kecepatan tinggi dan jangka panjang di bawah suhu normal. Selain itu, saat memisahkan plasma atau serum, kontaminasi bakteri harus dihindari.

Persiapan serum: gunakan jarum suntik tanpa antikoagulan untuk mengumpulkan darah dan pindahkan ke dalam tabung sentrifus, dan letakkan di bak air es selama 30 menit, pada suhu 4 ℃, 1000xg, 10 menit untuk sentrifugasi.

Setelah pemisahan plasma atau serum, jika tidak digunakan sementara, dapat dibekukan pada -80 ℃ dan digunakan dalam waktu 1 bulan. Catatan Untuk menghindari adsorpsi endotoksin, harap gunakan tabung reaksi kaca untuk penyimpanan.

3. Jenis dan efek antikoagulan

Selama persiapan plasma, karena penambahan antikoagulan tertentu, jenis dan jumlah antikoagulan berdampak besar pada tingkat pemulihan. Umumnya, antikoagulan yang umum digunakan terutama meliputi heparin, natrium sitrat, dan EDTA, di antaranya heparin adalah yang paling banyak digunakan. Namun, kita tahu bahwa heparin dalam jumlah besar akan mengganggu reaksi endotoksin, terutama untuk metode pemanasan pengenceran dan metode ekstraksi kloroform, yang akan mengurangi tingkat pemulihan, tetapi berdampak lebih kecil pada metode PCA, sehingga jumlah heparin yang ditambahkan dan dilepaskan selama persiapan plasma hanya membutuhkan 2~5 μ L/ml sudah cukup.